流式细胞术（Flow Cytometry，FCM）简称“流式”，是利用流式细胞仪，对处于快速流动的液流中的单个细胞或生物颗粒，通过光源时的物理化学性质进行多参数定性、定量分析（及分选）的技术，是一门综合了细胞化学、细胞免疫学、激光技术、计算机技术等多门学科的技术。总之，就是非常的“高大上”。

这么“高大上”的技术，当然用处也是非常大，目前，流式主要可以帮助临床医生进行白血病和淋巴瘤的免疫分型，同时也可为大家都非常关注的微小残留病（MRD）的监测，以及白血病和淋巴瘤的治疗和预后等提供重要信息。不仅如此，流式还可用于淋巴细胞亚群分析、造血干细胞计数，以及阵发性睡眠性血红蛋白尿症（PNH）、血小板功能、细胞因子的检测等。

那这项如此“牛”的技术，到底是什么工作原理呢？作为肿瘤患者及家属，还需了解关于流式的哪些基础知识呢？高博医学（血液病）广东研究中心南方春富（儿童）血液病研究院一起接着往下看。

一、流式的工作原理

在介绍流式的工作原理前，大家需要先知道抗原抗体的概念。

人体细胞表面及细胞中都存在有很多标志物，我们把这些标志物叫做“抗原”。这些抗原就是细胞身上特殊性的标记，可以用来区分于其他不同细胞。

而抗体就是能特异性与抗原结合的蛋白，类似于锁与钥匙的关系。而流式细胞术是基于抗原抗体反应结合的原理。

将携带有荧光的抗体加入检测样本中，抗原和抗体会发生特异性结合，之后样本中的细胞会排成一串，一个接一个通过检测区，在这个过程中，激光会激发抗体携带的荧光，流式细胞仪采集到这些荧光信号后经过计算机分析就得到了流式图。以下是小编自创的示意图，大家看图自行领悟。

那基于这样的原理，流式又是如何精准识别白血病细胞的呢？

二、流式如何识别白血病细胞？

在人体白细胞从幼稚细胞分化为成熟细胞，以及被激活的过程中，细胞表面会出现一系列的标记分子，也就是上文提到的抗原。这些抗原种类繁多，医学界一般用“CD”进行表示，为了方便区分，我们进行了编号：CD1、CD2、CD3….….

存在于细胞表面的多种抗原，可以形象地理解为荔枝皮表面形状各异的突起。不同的细胞抗原类型不同，且同种细胞在不同的分化发育阶段表达的抗原也不尽相同。

流式细胞术正是通过检测细胞的抗原的表达情况来辨别其来源、分化程度和判断是否异常。与传统的检测方法相比更加简便、快捷，特异性及灵敏性也较高，对临床诊断及治疗具有积极意义。

细心的读者会发现流式细胞术需要对样本中的每个细胞进行检测，那这是不是对采集的样本有一些特殊要求呢？

三、流式的样本要求

流式细胞仪的标本来源常规包括外周血、骨髓、脑脊液、浆膜液等，临床上会根据不同的检测需求采集相应的标本，其中外周血和骨髓最为常见，体液样本含细胞数量较少，往往需要多采集一些。

为保证结果的准确性，保持样本的新鲜很重要，采样后应尽快送检（最好于24h内送检）。通常血液标本可在室温短暂保存。标本运输过程中，应该一直保持低温，温度不超过18度，也应该避免低于4度。

但是否只有液体标本才能做流式分析呢？其实不然，新鲜的实体组织标本，无论是活检还是穿刺获得的，均可以进行流式检测，只需要将其制备成液体状态（细胞悬液）即可。对于实体标本，同样需要尽快（＜24小时，最长不超过48小时）送达实验室，建议全程冷链（不能冷冻，不要用干冰）。

经过对样本的采集、处理、运输及分析后就可以得到流式的检查结果—流式图。

四、流式图是什么？

流式图可以是直方图、散点图，也可以是数值。

以更加常用的散点图为例，横纵坐标表示的相应抗原结合的抗体荧光信号的强度，图上每个点都代表一个细胞。

如下图所示，两种CD22和CD20结合抗体荧光信号都不带的细胞分布在Q1，就代表这里的细胞CD22和CD20都不表达；相应的，分布的Q3细胞就代表两种抗原都是强表达的，即CD22和CD20双阳性细胞；而Q1和Q4中的细胞即是只表达其一种抗原的单阳性细胞。

根据细胞表面抗原的表达情况及细胞比例，诊断专家会给出最终的结论与诊断建议。

白血病的诊疗过程中，会用到各种各样的检测手段，那流式又是如何发挥自身优势的呢？

五、流式在白血病诊疗中的应用

1.急性白血病的免疫分型

血液系统疾病中，急性白血病比较常见，可分为急性髓系白血病与急性淋巴细胞白血病，髓系白血病在成年人中比较多见，而淋巴细胞白血病在儿童群体中多发，由于该病进展比较快，临床上应尽早诊断及时治疗。

多项研究就表明，与既往的形态学检测相比，流式细胞术能够快速且精准的区分白血病细胞与正常细胞，对急性白血病免疫分型准确诊断，配合其他抗原辅助诊断方法，可显著提高急性白血病诊断准确率，为临床治疗方案的制定提供可靠依据。

2.微小残留病（MRD）监测

微小残留病（MRD）是指白血病患者经诱导化疗或造血干细胞移植达到完全缓解后，体内残留的微量白血病细胞。MRD检测对于白血病患者的复发和耐药情况具有一定的提示意义，还可用于评估造血干细胞移植患者的预后情况。

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研究显示，与骨髓穿刺后做形态学检查相比，流式检测急性白血病患者的外周血创伤更小且敏感性更高。同样通过外周血MRD检测可以评估急性淋巴细胞白血病的预后情况，对复发率评估也有一定的意义。

MRD检测手段多种多样，与基因筛查相比，流式的成本相对较低，具有经济快捷的优点，因此在临床应用也更加广泛。且对于没有特殊融合基因或基因重排的患者，流式可以作为PCR的替代手段来监测MRD。

白血病患者的整个诊疗过程需要多次进行流式检测，从最开始的确诊及免疫分型，到病程中治疗效果的监测，以及化疗或者骨髓移植完全缓解后进行微小残留病变的检测，都离不开流式。白血病患者有必要建立对流式细胞术的基础认知，从而更好地参与并配合临床的诊疗工作。